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2014/2015

微小RNA-34a 通過靶向CD44調節膀胱癌細胞J82周期

《南方醫科大學學報》,2015,35(7):935-940

Author(s)余淦
許凱
許世安
張曉嵐
黃倩華
郎斌
Summary

目的
觀察微小RNA-34a(miR-34a)對膀胱癌細胞J82週期的影響,並探索其中的機制。


方法
於J82中轉染miR-34a前體或miR-34a抑制物並驗證轉染效率,結合此前研究報導和生物資訊學預測miR-34a的靶點,後通過螢光素酶報告實驗驗證miR-34a靶標基因CD44,通過Western blot和即時定量PCR方法檢測CD44及其週期相關蛋白及信使RNA表達水準的變化,利用流式細胞儀檢測膀胱癌細胞J82週期的變化。


結果
miR-34a在膀胱癌細胞J82和組織中表達下調,轉染miR-34a前體和抑制物後,獲得滿意的轉染效果;雙螢光素酶報告實驗證實miR-34a對CD44的3'UTR活性顯著調節,並伴隨相關週期相關因數表達水準變化,同時觀測到其對膀胱癌細胞J82週期的影響。miR-34a mimics明顯降低膀胱癌細胞J82中CD44的表達,miR-34a inhibitor明顯上調膀胱癌細胞J82中CD44的表達;CD44可以部分回復mir-34a對膀胱癌細胞J82週期的影響。


結論
微小RNA-34a通過直接靶向CD44調節膀胱癌細胞J82週期的變化。


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